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                    RayBiotech抗體芯片在遺傳代謝疾病研究中的應用


                    雜志名稱:Nature Communications


                    文獻題目:LeeH, Lee J K, Park M H, et al. Pathological roles of the VEGF/SphK pathway inNiemann–Pick type C neurons[J]. Nature communications, 2014, 5


                    第一作者:LeeH

                    作者單位:Stem Cell Neuroplasticity Research Group, Kyungpook National University, Daegu 702-701, Korea

                    本實驗所用產品:RayBiotech?Mouse AAM-CYT-CUST抗體膜芯片20個定制細胞因子抗體芯片)

                    實驗樣品:細胞培養上清


                    研究背景:

                    ? ??尼曼匹克氏病(Niemaoh-Pick disease)又稱鞘磷脂沉積病(sphingomyelinlipidosis),屬先天性糖脂代謝性疾病鞘氨醇積累的病理作用尚未被完全解析,本論文中研究者發現在NP-C病人成纖維細胞和NP-C小鼠(PNs)浦肯野神經細胞中由于VEGF的影響,鞘氨醇激酶(SphK)活性降低。鞘氨醇積累由于VEGF/SphK信號通路失活導致PNs減少,通過抑制的NP-C小鼠自噬體-溶酶體融合導致的PN損失。VEGF通過與VEGFR2結合后激活SphK,導致鞘氨醇存儲減少,同時改進的PN細胞存活以及NP-C細胞和小鼠臨床成效。研究結果還表明,從人類NP-C神經元細胞衍生的誘導性多功能干細胞(iPSC)中VEGF/SphK信號通路失活導致的異常是由VEGF補給修正。總的來說,這些結果揭示了NP-C的神經元致病機制,即SphK活性的降低是由于VEGF水平的受損。


                    1 結果

                    1.1?芯片樣品準備

                    l??小鼠模型及細胞模型建立

                    l??BM-MSCsNP-C PNs共培養,提取培養上清

                    l??BM-MSCsWT PNs共培養,提取培養上清

                    1.2?共培養對鞘氨醇激酶(SphK)活性的影響

                    為了鑒定BM-MSCs(骨髓間充質干細胞)分泌的細胞因子是否會影響NP-C小鼠細胞的鞘氨醇激酶(SphK)活性,將BM-MSCs和NP-C小鼠(PNs)浦肯野神經細胞進行非接觸式共培養,結果發現NP-C PNs的SphK活性顯著增高,見下圖。



                    結論

                    ???RayBiotech芯片的篩查結果為尼曼匹克氏病鞘氨醇積累機制研究提供了非常重要指引作用,尋找到VEGF的變化對SphK活性有很大影響,對尼曼匹克氏病的病理研究和治療研究起到重要作用。


                    RayBio作為國際領先的蛋白芯片和免疫產品專業供應商,擁有世界上種類最多的抗體芯片及ELISA及產品,其產品檢測靈敏度高,種屬多樣,包括涵蓋人、小鼠、大鼠、豬、馬、牛、猴、犬、貓、兔等多個種屬。 使用RayBio公司產品發表的文獻達到數千篇。


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                                      姬川优奈